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小鼠Elisa试剂盒操作技巧

更新时间:2018-04-19      浏览次数:1357
小鼠Elisa试剂盒检测实验中,包被原的性质很重要,蛋白浓度,是否降解,这关系到你做出的抗体可不可以被其识别,所以保留抗原很重要,做重组蛋白时,要在冰浴下缓慢融化就是这个道理。封锁就是让大量不相关的蛋白质充填这些旷地空闲,从而排斥Elisa后的步骤中干扰物质的再吸附。但有时因为试验的需要,包被原的特殊性也可能采用中性的缓冲溶液来包。
小鼠Elisa试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。该法适于测定细胞培养上清、血清、血浆及组织液中的样本,干扰小可以测到每毫升纳克水平的细胞因子(或受体)的水平。
小鼠Elisa试剂盒操作技巧:
1.加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
2.合理安排检测量,以免反应板过多造成洗板等待时间长。
3.吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
4.要尽量做双孔实验,这样才既能保证数据的准确性,又能反映出试剂盒的精密度。
5.样品稀释液应用加液器加注,并经常校对其准确性。
6.为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜。
7.未使用完的酶标板或者试剂,请于2-8℃保存。辣根过氧化物酶标记抗人IgG工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的辣根过氧化物酶标记抗人IgG工作液。
8.小鼠Elisa试剂盒实验中,加样后及时放人孵箱,标本较多时,要分批操作。按说明步骤严格控制操作时间,防止孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。
9.剩余样品及废弃物应经121℃高压蒸汽灭菌30分钟,或用5.0g/L次氯酸钠等消毒剂处理30分钟后废弃。
10.人ELISA试剂盒洗涤时各孔均需加满液体,防止孔口有游离酶不能洗净。
11.每次实验留一孔作为空白调零孔,该孔不加任何试剂,只是zui后加底物溶液及2N H2SO4。测量时先用此孔调OD值至零。
12.手工洗板时每次加入洗涤液后。应静置15——30s,不要将一个酶标孑L中的洗涤液溅入另一酶标孔中,防止交叉污染。甩去洗涤液后将酶标板放在毛巾或吸水纸上拍干。
13.小鼠Elisa试剂盒对样本的结果有疑问时需要使用其他检测方法进行验证。
14.没有去离子水或双蒸水时,可以使用娃哈哈纯净水配制溶液,切勿使用自来水。
15.在使用微量加样器时,吸取不同瓶子中液体后要更换枪头,即使吸取标准品溶液。
16.吸取液体时速度不易太快,以免产生气泡,人ELISA试剂盒吸取的量不够准确。
17.吸取液体时要选用量程和需要量接近的微量加样器吸,减少误差。 
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