更新时间：2023-12-21 
浏览次数：476人胰岛素原 (PI)ELISA使用说明书
胰岛素原(PI)是胰岛素的前体激素 ， 它是由由胰岛β细胞合成和分泌 ， 主要 在肾脏分解代谢。生理情况下 ，只有极少量的胰岛素原释放入血 ，在病理情 况下 ，胰岛β细胞释放胰岛素原增多 ，血中胰岛素原水平升高。 它是细胞在 裂解成成熟胰岛素之前分泌的最后一个单链蛋白结构。 它是由芝加哥大学的Donald F. Steiner教授在1967年发现的。
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA） 。往预先包被有人 胰岛素原(PI)捕获抗体的微孔中 ，依次加入样本、标准品、生物素标记的检测 抗体 ，HRP 酶结合物 ， 中间经过温育和洗涤 ，用底物TMB 显色 ，TMB 在过 氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色 ，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色 的深浅和样品中的人胰岛素原(PI)呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定
吸光度（OD 值） ，计算样品浓度。
灵敏度：4.79pg/mL
检测范围：12.5-800pg/mL
特异性：可检测样本中人的PI ，且与其类似物无明显交叉反应。
浓度(pg/mL) | 800 | 400 | 200 | 100 | 50 | 25 | 12.5 | 0 |
OD 值 | 2.32 | 1.93 | 1.31 | 0.85 | 0.51 | 0.39 | 0.28 | 0.1 |
校正 OD 值 | 2.22 | 1.83 | 1.21 | 0.75 | 0.41 | 0.29 | 0.18 | - |
试剂盒性能：
1. 重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于 10%。
2. 回收率 ：在选取的健康人血清、血浆和细胞培养上清中加入 3 个不同
浓度水平的人PI ，计算回收率。
样本类型 | 范围（%） | 平均回收率（%） |
血清(n=8) | 84- 101 | 96 |
血浆(n=8) | 92- 105 | 102 |
细胞培养上清(n=8) | 96- 108 | 105 |
3. 线性稀释：分别在选取的4份健康人血清、血浆和细胞培养上清中加入
高浓度人PI ，在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
稀释比例 | 回收率（%） | 血清 | 血浆 | 细胞培养上清 |
1：2 | 范围 |
84-95 |
88-97 |
90- 110 |
平均回收率 |
91 |
93 |
96 | |
1：4 | 范围 | 89- 103 | 87- 108 | 105- 115 |
平均回收率 | 94 | 98 | 109 |
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