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ELISA试剂盒重点:​ELISA试验中缓冲溶液等试剂的配方

更新时间:2018-02-27      浏览次数:1543

 

ELISA试剂盒重点:​ELISA试验中缓冲溶液等试剂的配方

ELISA试验中是以抗原和抗体的免疫反应为根底,ELISA试剂以及各种溶液如何装备?上海晶抗技术教师将ELISA试验,各种ELISA装备办法汇总如下:
(1)ELISA试验包被缓冲液
(2)ELISA试验洗刷缓冲液
(3)ELISA试验稀释液;
(4)ELISA试验停止液
(5)ELISA底物缓冲液
(6)ELISA试验TMB(四甲基联苯胺)运用液
(7)规范品稀释液。
试剂配方:
a, ELISA底物缓冲液(PH5.0磷酸棗柠檬酸):
0.2M Na2HPO4(28.4克/L)              25.7ml
0.1M 柠檬酸(19.2克/L) 24.3ml
加蒸馏水50ml。
b, ELISA试验TMB(四甲基联苯胺)运用液:
TMB(10mg/5ml无水乙醇)   0.5ml
底物缓冲液(PH5.5)   10ml
0.75%H2O2                           32μl
c,规范品稀释液:
PBS 1L配方pH7.2-7.4.浓度0.01mol/L:
磷酸二氢钾(KH2PO4):0.27g,
磷酸氢二钠(Na2HPO4):1.42g,
氯化钠(NaCl):8g,
KCl 0.2g,
加去离子水约800mL充沛拌和溶解,然后参加浓盐酸或许氢氧化钠调pH至7.2-7.4,zui终定容到1L.浓度为10mmol/L
d,ELISA试验包被缓冲液(PH9.6 0.05M碳酸盐缓冲液):
NaHCO3    1.59克
NaHCO3 2.93克
加蒸馏水至1000ml
e, ELISA试验洗刷缓冲液(PH7.4 PBS):0.15M
KH2PO4   0.2克
Na2HPO4·12H2O 2.9克
NaCl   8.0克
KCl 0.2克
Tween-20 0.05%  0.5ml
加蒸馏水至1000ml
f, ELISA试验稀释液:
牛血清白蛋白(BSA) 0.1克
加洗刷缓冲液至100ml
或以羊血清、兔血清等血清与洗刷液配成5~10%运用。
g, ELISA试验停止液(2M H2SO4):
蒸馏水178.3ml,逐滴参加浓硫酸(98%)21.7ml。
h,ELISA试验封闭液:
牛血清白蛋白(BSA) 5克
加洗刷缓冲液至100ml。
值得一提的是有的封闭液中含有脱脂奶粉,不适合长期保存。为了确保ELISA试验的准确性,试验操作中参加的缓冲液和各组分一定要准确,将洗刷液参加酶标板中的时分避免参加的试剂混入另外一个酶标孔,谨防穿插污染。

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