小鼠Elisa试剂盒操作流程标准化，新手也能轻松上手

在生命科学研究中，小鼠作为一种重要的实验动物模型，其体内各种生物分子的检测对于揭示疾病机制、评估药物效果以及研究生理过程具有重要意义。小鼠ELISA试剂盒作为一种高效、灵敏的检测工具，广泛应用于小鼠样本中特定抗原、抗体或生物分子的定量分析。

一、小鼠ELISA试剂盒的功能与原理

小鼠ELISA（酶联免疫吸附测定）试剂盒基于抗原抗体特异性结合的原理，通过酶促反应实现对目标分子的定量检测。其核心原理是利用特异性抗体包被在酶标板上，当样本中的目标分子与包被抗体结合后，再加入酶标记的二抗，形成“抗体-抗原-酶标记抗体”的夹心复合物。通过加入显色底物，酶促反应产生的颜色变化可以通过酶标仪在特定波长下检测，从而实现对目标分子的定量分析。

例如，Elabscience推出的微量法小鼠白介素18（IL-18）ELISA试剂盒，采用双抗体夹心法，检测范围为15.63-1000 pg/mL，灵敏度低至9.38 pg/mL，能够精准检测小鼠样本中的IL-18。这种试剂盒的检测原理是利用抗小鼠IL-18抗体包被酶标板，样本中的IL-18与包被抗体结合后，加入生物素化的抗小鼠IL-18抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素，最终通过显色反应实现定量检测。

二、小鼠ELISA试剂盒的用途：

1.炎症与免疫研究

可用于检测炎症相关细胞因子，如白介素（IL）系列、肿瘤坏死因子（TNF）等。例如，IL-18在自身免疫性疾病（如类风湿关节炎、系统性红斑狼疮）和感染性炎症（如细菌、病毒感染引发的炎症反应）研究中具有关键作用。通过检测这些细胞因子的水平，研究人员可以探讨炎症发生发展的机制及评估治疗效果。

2.代谢性疾病研究

在肥胖、糖尿病等代谢性疾病中，某些细胞因子（如IL-18）参与调节脂肪细胞代谢和胰岛素抵抗过程。可帮助研究人员深入研究代谢性疾病与免疫炎症的关联。

3.肿瘤研究

细胞因子在肿瘤免疫监视和肿瘤微环境调控中发挥重要作用。例如，IL-17A在肿瘤发生发展机制和免疫治疗效果评估中具有重要价值。可用于检测肿瘤组织或血清中的相关细胞因子，为肿瘤免疫治疗策略的开发提供依据。

4.药物研发

在新药研发过程中，可用于检测动物模型中药物对特定生物分子表达水平的影响，为药物的抗炎、免疫调节等作用机制研究提供数据支持。

三、小鼠ELISA试剂盒的使用方法：

1.试剂准备

所有试剂需在使用前恢复至室温。例如，浓缩洗涤液需按1:20比例与蒸馏水稀释，底物液A和B使用前按1:1体积充分混合。

2.样本处理

根据试剂盒说明书的要求，对样本进行处理。例如，血清、血浆或细胞培养上清等样本需按照指定体积加入到酶标板中。

3.操作步骤

-设置标准品孔、样本孔和空白孔，分别加入相应液体。

-除空白孔外，加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体，用封板膜盖住反应板，37°C孵育。

-洗板5次，确保移除残留液体。

-加入底物混合液，37°C孵育后加入终止液。

-在450nm波长处用酶标仪读取各孔吸光度（OD值），通过标准曲线计算样本中目标分子的浓度。

四、小鼠ELISA试剂盒的优势：

-高灵敏度：能够检测低丰度的目标分子，例如，某些试剂盒的检测限可达15.6 pg/mL。

-高特异性：采用高特异性抗体对，与其他细胞因子交叉反应极低。

-微量样本需求：部分试剂盒仅需25-50μL样本，适合珍贵样本或微量样本检测。

-操作简便：配套试剂齐全，操作流程标准化，新手也能轻松上手。

-快速检测：从样本处理到结果读取，通常仅需3.5-4小时。