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植物蔗糖合成酶(SS)ELISA试剂盒案例说明

更新时间:2017-09-06      浏览次数:1074

植物蔗糖合成酶(SS)ELISA试剂盒(活性检测)

英文名称:Plant SS ELISA Kit
实验类型:夹心法
检测范围:5 IU/ml  160 IU/ml
zui低检测限:1.0 IU/ml
应用范围:血清、血浆、组织匀浆、细胞培养物上清或其它相关液体(本产品仅供实验室科研及非临床用途)

实验原理

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被植物蔗糖合成酶(SS)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并*洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的植物蔗糖合成酶(SS)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。

植物蔗糖合成酶(SS)ELISA试剂盒组成

试剂盒组成96孔配置48孔配置备注
微孔酶标板8孔×12条8孔×6条 无
标准品0.3mL×6管0.3mL×6管
样本稀释液6mL3mL
检测抗体-HRP10mL5mL
20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释
底物A6mL3mL
底物B6mL3mL
终止液6mL3mL
封板膜2张2张
说明书1份1份
自封袋1个1个
 

1.  标准品浓度依次为:160、80、40、20、10、5 IU/ml

2.  经过大量正常标本检验,标本的正常浓度值均在试剂盒提供的检测范围内,实验过程中直接取50μL样本上样即可。当有部分样本值超过zui大标准品浓度时,可用样本稀释液将标本进行适当稀释后再进行实验。

注意事项

1. 严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。

2. 洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。

3. 消除板底残留的液体和手指印,否则影响OD值。

4. 底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不能使用。

5. 避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。

6. 在储存和温育时避免强光直接照射。

7. 平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。

8. 任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。

9. 不能使用过期产品。

10. 如果可能传播疾病,所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。

 

 

 

洗板方法

手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。根据需要,重复此过程数次。

自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。

 

 

 

实验结果计算

以所测标准品的OD值为横坐标,标准品的浓度值为纵坐标,在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线,并得到直线回归方程,将样品的OD值代入方程,计算出样品的浓度。

Elisa试剂盒标准曲线图

(此图仅供参考)

 

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